基因编辑美味猪猪:新技术可快速培育非转基因克隆猪

  来源: 我是迷信家iScientist   基因编辑猪具有重要的农业和生物医学使用价值。但是,在基因编辑猪的消费进程中还存在一些费事:(1)很难疾速取得少量具有相反基因型的猪;(2)质粒DNA能够会被随机整合到目的细胞的基因组中;(3)单克隆选择进程能够降低供体细胞的质量。   最近,中国农业迷信院深圳植物迷信研讨所和农业基因组研讨所的研讨人员在《中国迷信:生命迷信》杂志上宣布了一篇题为“一种非转基因的办法,无需单克隆选择即可疾速无效繁衍基因编辑猪”的研讨论文。他们开发了一种高效的RNA编辑技术体系,名为报告RNA富集的双引导RNA核蛋白(RE-DSRNP),用于疾速构建无外源DNA基因编辑的克隆猪,并使用此办法经过编辑WIP1基因树立了猪雄性生殖妨碍模型。   为了进步编辑的精确性和效率,本文采用了双引导RNA技术,应用CRISPR-Cas9核糖核蛋白(RNP)编辑零碎停止无基因编辑,成功防止了质粒DNA随机整合到基因组的风险,并且具有低脱靶效应和更低的毒性。本研讨还将报告RNA富集零碎与双引导RNA核蛋白(DSRNP)无机结合,在进一步进步编辑效率的根底上消弭了单克隆细胞选择进程,从而使供体细胞培育工夫从3-4周延长到1周,明显降低了供体细胞发作凋亡和非整倍体染色体的比例。   为了验证RE-DSRNP在树立基因编辑克隆猪中的使用效果,研讨人员以梅山猪为资料,应用RE-DSRNP零碎对其WIP1基因停止了靶向编辑。后果标明,在取得的32头断奶基因编辑猪中,31头(97%)携带WIP1基因,15头(47%)为设计的DNA片段缺失纯合子型(-38 bp/-38 bp) ,一切的克隆猪均未检测到脱靶,且经WIP1编辑的猪表现出雄性生殖妨碍。种公猪在生猪育种和商品化消费中起着无足轻重的作用,对母猪的繁衍力有着决议性的影响。本文初次构建了WIP1基因编辑猪繁衍模型,关于深化研讨雄性繁衍机制具有重要意义。   RE-DSRNP介导的高效编辑零碎及其在生成WIP1基因编辑猪模型中的使用|参考文献[2]   体细胞克隆基因编辑技术是目前繁衍基因编辑植物的主流技术,普遍用于植物育种和医学模型的开发。本文研发的RE-DSRNP零碎能明显降低脱靶和非预期效应的影响,大大进步效率,延长工夫。无望促进猪及其他植物生物育种和医学模型的树立和开展,具有宽广的使用前景。在大型植物中,RE-DSRNP弱小基因编辑功能及其发生SCNT供体细胞所需工夫的明显增加,支持了其在疾速发生非转基因克隆植物群体中的使用前景。   编译:四七   编辑:酥鱼   排版:尹宁流   图片来源:《怪诞小镇》   参考文献   [1] https://www.eurekalert.org/news-releases/947576   [2] Xu, K。, Zhang, X。, Liu, Z。 et al。 A transgene-free method for rapid and efficient generation of precisely edited pigs without monoclonal selection。 Sci。 China Life Sci。 (2022)。 https://doi.org/10.1007/s11427-021-2058-2   研讨团队   通讯作者 李奎:博士生导师,教授。中国农业迷信院一级岗位出色人才,国度严重人才工程当选者,农业部有突出奉献中青年专家。次要围绕猪骨骼肌发育,猪基因组、猪基因工程、实验用小型猪及医学模型等方面停止实际和技术创新。掌管国度严重迷信研讨方案(973),国度自然迷信基金重点项目,国度科技严重专项严重课题等多项国度级科研项目。获国度技术创造二等奖1项(第一完成人),省部级科技奖励15项。受权国际专利2项,国度创造专利50余项。在国际刊物宣布SCI论文150余篇。   课题组首页 http://www.agis.org.cn/index.htm   论文信息   发布期刊 《中国迷信:生命迷信》Science China Life Sciences   发布工夫 2022年 1月28日   论文标题A transgene-free method for rapid and efficient generation of precisely edited pigs without monoclonal selection   (DOI: 10.1007/s11427-021-2058-2 )

发表评论